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大鼠前体脂肪细胞分离培养方法的改进_张孝珍

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文档简介:

JTCVMJTCVM2017年36卷第2期Vol.362017No.2收稿日期:2016-12-04基金项目:国家自然科学基金(31460589);国家级大学生创新创业训练计划项目(201510742081)作者简介:张孝珍(1992-),女,在读本科,动物科学专业,E-mail:857074750@qq.com通信作者:张国华,博士,副教授,E-mail:zhgh513@126.com大鼠前体脂肪细胞分离培养方法的改进张孝珍,高广慧,陈妍,张国华(西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃兰州730124)摘要:前体脂肪细胞分离与培养是体外研究脂肪形成及其代谢机制的基础。本研究对目前采用的大鼠前体脂肪细胞分离培养方法进行了改进。前体脂肪细胞消化分离过程中,在Ⅰ型胶原酶消化后,取消尼龙筛过滤和离心操作,简化操作流程,减小污染几率,降低对前体脂肪细胞的损伤;加入研磨珠震摇,以充分分离前体脂肪细胞,提高细胞的获取率。改进后的前体脂肪细胞分离培养方法所培养的细胞生长曲线呈S型,符合细胞体外生长规律。本研究通过对操作过程的改良,建立了一种快速、方便、可靠的大鼠前体脂肪细胞分离培养体系。关键词:前体脂肪细胞;分离培养;方法改良中图分类号:S852.1文献标志码:A文章编号:1000-6354(2017)02-0017-04DOI:10.13823/j.cnki.jtcvm.2017.02.005脂肪形成包括脂肪细胞数目的增加和体积增大两个方面,包括前体脂肪细胞的增殖、分化及甘油三酯的合成。脂肪细胞的体外培养始于20世纪60年代初,目前最常用的有两种体外培养系统,即前体脂肪细胞系和原代前体脂肪细胞。原代培养细胞可以更好地反映细胞的在体特性,因此,前体脂肪细胞的原代培养是研究脂肪组织的理想模型。目前原代培养有组织块培养和酶消化法培养,组织块培养的细胞同源性好且具有操作简便和成功率高等优点,但培养的细胞成活率低,到可传代的时间较长,获得的细胞数量较少[1]。因此,多数研究人员均采用酶消化法进行前体脂肪细胞的培养[2~4],然而酶消化法操作过程繁琐,要求严格,细胞污染几率高。笔者等对大鼠前体脂肪细胞原代培养体系进行了改良,提供更为稳定、方便操作的培养体系,为前体脂肪细胞向脂肪细胞分化机制的研究、肥胖病因探索及肉品质改良提供更为有利的技术支持。1材料与方法1.1材料1.1.1实验动物20日

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